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解锁His标签蛋白纯化新选择,尽在88858cc永利官网!

发布时间:2025-02-17   信息来源:尊龙凯时官方编辑

蛋白质纯化在重组蛋白的生产流程中是至关重要的下游步骤。由于重组蛋白在化学和结构上的多样性,亲和标签成为实现高通量纯化的有效手段。这些亲和标签能够在复杂的背景下特异性富集低丰度的蛋白质,不仅提高了目标蛋白的产量,还能够赋予目标蛋白新的特性。

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His-Tag(通常为6个组氨酸)是当前最常用的蛋白质纯化亲和标签。其具有以下优点:

  • 分子量小,易于表达且免疫原性低
  • 能够与其他标签构建组合标签
  • 洗脱条件温和,易于再生
  • 成本低廉

在His标签蛋白的纯化过程中,博格隆推出了三种His标签纯化产品,包括鳌合Ni²⁺的NiBestaroseFF/HP以及未预先鳌合金属离子的IMACBestaroseFF和ChelatingBestaroseFF。这些产品采用了可供客户自行选择的金属离子进行偶联,为研究人员提供了多样化的选择。

具体来说,NiBestaroseFF是一种通过氨三乙酸(NTA)为配基而制得的亲和层析介质,能够有效捕获目标蛋白。IMACBestaroseHP/FF和ChelatingBestaroseFF能够让客户根据自身需求选择不同的金属离子。相比之下,ChelatingBestaroseFF介质提供了更强的亲和力,而IMACBestaroseFF由于多一个金属离子螯合位点,使其对金属离子的结合能力更强。

在纯化带有His标签的蛋白时,关注选择合适的介质至关重要。例如,使用88858cc永利官网的NiBestaroseFF纯化带有His标签的荧光蛋白,海量的普通样品可以通过此填料高效处理。此外,由于Ni柱不耐受强还原剂和强螯合剂,建议在进行蛋白质纯化前,通过透析或脱盐方式置换缓冲液,以确保纯化过程的顺利进行。

在产品选择上,推荐使用BestdexG-25M凝胶过滤填料或预装柱进行脱盐或缓冲液置换。BestdexG-25M凭借其亲水多孔的特性,可以快速处理大量样品,从而提高His标签蛋白与Ni柱的结合能力。同时经Ni柱纯化后的样品也能够利用BestdexG-25M去除高浓度的咪唑。

总之,蛋白质纯化是生物医疗研究的重要环节,选择合适的亲和填料和缓冲条件,能够有效提高蛋白质的纯度和产量。借助88858cc永利官网的产品,研究人员能够更加高效地进行蛋白质纯化,推动生物技术的发展。