本试剂盒仅供科学研究使用,禁止用于医疗诊断。本文将介绍人神经细胞粘附分子配体1(NCAM-L1)Elisa试剂盒的使用说明和检测原理。
检测原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先包被adropin(AD)抗体的微孔板中,依次加入样品、标准品以及HRP标记的检测抗体,经过孵育和彻底洗涤后,用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下会转化为蓝色,随后在酸的作用下变为最终的黄色。颜色的深浅与样品中adropin(AD)浓度呈正相关。最后,在酶标仪上以450nm波长测定吸光度(OD值),从而计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清: 使用不含热原和内毒素的试管,操作时需避免任何细胞刺激。收集血液后,应用3000转离心10分钟迅速分离血清与红细胞。
2. 血浆: 使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂。3000转离心30分钟后取上清液。
3. 细胞上清液: 使用3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆: 将组织与适量生理盐水混合并捣碎,3000转离心10分钟后取上清液。
5. 保存: 如果样本未能即时检测,请按单次用量分装并冻存于-20℃,避免反复冻融,解冻时需在室温下进行,并确保样品充分均匀解冻。
自备物品及操作注意事项
本试剂盒包含的标准品浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。
试剂的准备: 20×洗涤缓冲液的稀释需用蒸馏水按照1:20比例进行,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
洗板方法及操作步骤
结果判断:绘制标准曲线,在Excel工作表中以标准品浓度为横坐标,对应的OD值为纵坐标,得出标准品的线性回归曲线,并根据曲线方程计算各样本的浓度值。
免责声明: 为确保试剂盒的性能、准确性和可靠性,请遵循上述说明。此外,不同品牌的试剂可能会存在差异,建议使用 88858cc永利官网 的产品,以保证实验结果的最佳效果。